企业官网建设流程全解析

基本信息

中文名称：[丙氨酸 ²⁸⁶]- 钙调蛋白依赖性蛋白激酶 II 片段 (281-302)

三字母序列：Met-His-Arg-Gln-Glu-Ala-Val-Asp-Cys-Leu-Lys-Lys-Phe-Asn-Ala-Arg-Arg-Lys-Leu-Lys-Gly-Ala

单字母序列：MHRQEAVDCLLKLFNARRKLLGA

氨基酸数目：22 个氨基酸，无末端酰胺修饰

分子式：C111H191N39O29S2

分子量：2600.11

结构式：

基本性质

该多肽为 CaMKII（钙调蛋白依赖性蛋白激酶 II）281–302 区域片段，286 位氨基酸突变为 Ala，属于单点丙氨酸扫描突变肽。序列含 Met、Cys、Phe 残基；Met 易氧化，Cys 存在巯基，容易发生二硫键交联，样品保存时需注意抗氧化。多肽含有多个 Lys、Arg 碱性氨基酸，整体呈强碱性，水溶性较好，产品形态为冻干粉末，吸湿性较强。水溶液对蛋白酶敏感，常温放置易降解，稳定性较差。序列中的 Phe 可提供 280nm 紫外吸收，方便 HPLC、UV 检测。

作用机理

CaMKII 是中枢神经系统非常关键的丝氨酸 / 苏氨酸蛋白激酶，参与突触可塑性、学习记忆、神经元信号传导。281–302 区域位于 CaMKII 的自身抑制结构域，正常状态下该片段结合激酶催化结构域，抑制激酶活性；当钙 - 钙调蛋白复合物结合后，构象改变，解除自抑制，激活 CaMKII。 286 位突变为 Ala 会改变该多肽片段与 CaMKII 催化域之间的相互作用，用来评估该位点残基对于自抑制结合、激酶活性调控的贡献。该多肽可以模拟 CaMKII 自身抑制区，竞争性结合激酶活性位点，抑制 CaMKII 磷酸化底物，用于体外酶活实验。

应用领域

1. 蛋白激酶构效关系研究：丙氨酸扫描实验，确定 286 位残基在 CaMKII 自抑制、分子内相互作用中的功能。
2. CaMKII 酶活体外检测：作为抑制肽，用于激酶活性分析，研究 CaMKII 底物结合与自抑制机制。
3. 神经信号通路研究：研究突触可塑性、长时程增强 LTP 相关的 CaMKII 信号调控。
4. 蛋白 - 多肽相互作用实验：SPR、ITC、Pull-down 等实验，测定多肽和 CaMKII 催化结构域的结合亲和力。
5. 药物靶点筛选：CaMKII 是神经退行性疾病、癫痫、慢性疼痛潜在靶点，该多肽作为工具肽用于靶向抑制剂的体外筛选对照。

药物研发

CaMKII 过度激活和阿尔茨海默病、缺血性脑损伤、心律失常等疾病相关。该突变多肽本身不是药物候选分子，仅作为科研工具肽。借助这类单点突变的自抑制片段，科研人员解析 CaMKII 的结合口袋，设计小分子抑制剂，阻断 CaMKII 异常激活，开发神经保护类候选药物。

研究进展

CaMKII 自抑制结构域多肽是研究该激酶自调控机制的经典工具。丙氨酸突变扫描是多肽领域常用手段，逐个替换氨基酸为 Ala，观察结合能力、抑制活性变化，定位关键功能残基。281–302 片段是公认的自抑制核心区域，[Ala²⁸⁶] 突变体常和野生型序列成对使用，对比验证该位点是否为维持自抑制构象的关键残基，大量体外生化实验采用该组多肽来阐明 CaMKII 激活的分子机制。

储存规范

干粉：-20℃避光密封保存，防潮，尽量减少反复开盖；含 Cys、Met，环境氧气会造成氧化，长期保存建议惰性气体保护。

溶液：使用无酶无氧缓冲液溶解，分装单次使用小体积，-80℃冻存；严禁反复冻融。现配现用最佳，避免巯基氧化形成二硫键聚合物。