生物素 - 亚油酰甘氨酸(Biotin-LinGly)亲和探针,依托小分子 Pull-down 联合 LC-MS 化学蛋白质组学,直接从细胞裂解液捕获 LinGly 结合蛋白,将 “预测靶点” 推进至体内直接验证,是 N - 酰基氨基酸脂质机制研究核心化学工具。
一、基础信息
亚油酰甘氨酸模块(脂质活性端):亚油酰甘氨酸是一种修饰型多不饱和脂肪酸(内源性同源物)。研究表明,它能够激活哺乳动物皮肤、脊髓和大脑中表达的 hKCNQ1/hKCNE1 通道,并在动物研究中展现出镇痛活性。
生物素模块(信号捕获端):作为经典的亲和标签,生物素能够与链霉亲和素(Streptavidin)或亲和素发生极强的特异性结合,从而赋予该分子靶向定位、富集和高灵敏度检测的能力。
二、Pull-down实验首选合成路线:
起始原料:ω-NH₂-LinGly(烷基远端引入伯氨基,头部羧基完整保留)
无水 DMF 弱碱性环境,室温避光酰胺偶联;全程氮气保护,防止双烯氧化
C18 反相制备 HPLC 纯化
优势: 完整保留游离羧基、内源酰胺骨架、顺式不饱和双键;酰胺连接键生理环境稳定,裂解液不易水解;
Linker 推荐: 基础筛选:6 碳烷基 LC 接头;降低非特异性吸附、活细胞实验优选 PEG4 柔性接头。
三、科研用途:
1.脂酰氨基酸结合蛋白 pull-down
2.LOX/COX 氧化产物追踪
3.脂肪酸摄取与膜定位对照
4.纳米载体表面锚
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