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一、基本信息

• 英文全称：Big Endothelin-1 (1-39) (porcine)
• 中文全称：猪源全长大内皮素 1（1–39 肽）
• 释义：Big Endothelin-1 为内皮素 1 无活性前体全长多肽，猪源序列共 39 个氨基酸，经内皮素转化酶 ECE 剪切生成成熟活性 ET-1。
• 三字母序列：Cys-Ser-Cys-Ser-Ser-Leu-Met-Asp-Lys-Glu-Cys-Val-Tyr-Phe-Cys-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp-Val-Asn-Thr-Pro-Glu-His-Ile-Val-Pro-Tyr-Gly-Leu-Gly-Ser-Pro-Ser-Arg-Ser
• 单字母序列：CSCSSLMDKECVYFCHLDIIWVNTP EHIVPTYGLGSP SRS
• 氨基酸总数：39 aa
• 分子式：C193H293N49O58S5
• 分子量：4388.05
• 结构修饰说明

1. 线性全长前体肽，无 N 端生物素、无焦谷氨酸、无 C 端酰胺修饰；
2. 两组分子内二硫键（内皮素家族特征双环结构）：

• Cys¹ ↔ Cys¹⁵
• Cys³ ↔ Cys¹¹
  双二硫键维持 N 端环区天然折叠，是 ECE 高效识别底物的必要构象；

3.22–39 位为 ECE 酶切识别羧基端区段，对应猪 Big ET-1 底物功能区；

4.含 Met 残基，为人源 Big ET-1 (1-38) 不存在的易氧化位点。

• 结构式：

二、理化性质

1.紫外定量：含 Trp、Tyr、Phe，280 nm 紫外吸收显著，可紫外分光光度法定量；

2.稳定性要点

• 4 个 Cys 构成双二硫环，体系严禁 DTT、β-ME 等还原剂，否则环结构断裂、多肽完全失活；
• 含 Met，极易氧化失活；溶解、分装全程冰浴、缩短敞口接触空气；长期冻干粉需充氮气隔氧保存；
• Trp、Tyr、Phe 均为强光敏芳香残基，配液、储存全程避光；
• 无末端封闭修饰，N、C 两端易被氨肽酶、羧肽酶及 ECE 降解，工作液必须现配现用；

3.电荷特性
酸性残基：Asp、Glu；碱性残基：Lys、His、Arg；整体偏弱酸性；适配 pH 6.0–7.4 PBS、猪血管内皮、肺动脉平滑肌、猪血浆缓冲体系；

4.溶解性
Ser、Thr、Asn 亲水残基丰富，搭配带电氨基酸，中性 PBS 常温可完全溶解；

5.空间构象
N 端 1–15 位依靠两组二硫键形成双环刚性骨架；22–39 位柔性区段为 ECE 特异性结合与切割位点，双环结构调控酶切效率。

三、生物学背景

猪 Big ET-1 (1-39) 是猪内皮素前体原剪切生成的全长前体，自身无强缩血管活性；内皮素转化酶 ECE 在 21 位 Ile 与 22 位 Val 之间切断肽键，释放成熟 ET-1，ET-1 结合 ETₐ/ETᵦ受体介导强效血管收缩、平滑肌增殖。仅适用于猪心血管、肺循环相关体外实验，与人源 Big ET-1 序列存在多处物种差异。

四、生物学功能

1. 作为 ECE 天然全长底物，体外酶切产生活性 ET-1，诱导血管收缩、血管重构、肺动脉高压、肾脏损伤；
2. N 端双环结构维持多肽正确折叠，保障 ECE 识别与催化效率；
3. 参与猪心血管稳态、肺循环、肾脏微循环相关病理调控。

五、科研应用

1. 猪原代肺动脉平滑肌、血管内皮细胞 ECE 酶活力检测、ECE 小分子抑制剂筛选；
2. Pull-down 实验探究 ECE 与猪源 Big ET-1 全长前体的蛋白相互作用；
3. 猪高血压、肺动脉高压、血管纤维化体外细胞模型；
4. 人 / 猪 Big ET-1 全长前体序列、酶切效率、受体效应跨物种对比研究；
5. 全长 Big ET-1 与截短体 (22-39) 对照，研究 N 端双环对 ECE 催化活性的调控机制。

六、溶解与储存规范

1. 溶解：pH7.2 无菌 PBS 冰浴避光配制，全程禁用还原剂，缩短敞口时间防止 Met 氧化、二硫键断裂；
2. 冻干粉：短期 - 20 ℃避光密封；长期分装充氮气隔氧，-80 ℃避光储存；
3. 工作液：单次分装避免反复冻融；2~8 ℃避光存放不超过 3 天，酶活检测实验现配现用。